HLA分(fēn)型SSO法
簡介
LABType® SSO使用序列特異性的寡核苷酸探針連接到熒光染色的微珠上來檢測樣品DNA編碼的等位基因。LABType® SSO技術隻需PCR擴增靶DNA，雜(zá)交和檢測在同一(yī)個反應混合物(wù)中(zhōng)完成，所以該方法既适于小(xiǎo)規模又(yòu)适于大(dà)規模的的HLA分(fēn)型實驗。相對于淋巴細胞毒試驗的實驗結果（1=陰性--- 8=陽性），LABType®的試驗結果隻有陰性和陽性兩種結果，這就排除了複雜(zá)的結果分(fēn)析。此外(wài)，HLA系統的交叉反應組導緻血清學分(fēn)型錯綜複雜(zá),而PCR-SSO（聚合酶鏈式反應—序列特異性寡核苷酸）能區分(fēn)單個核苷酸的改變。
SSO原理
LABType®在反向SSO DNA分(fēn)型法中(zhōng)應用Luminex技術。首先，靶DNA使用組特異性引物(wù)進行PCR擴增。PCR産物(wù)是被生(shēng)物(wù)素化的，可以使用R-藻紅蛋白(bái)結合鏈黴親和素（SAPE）進行檢測。
PCR産物(wù)先被變性，然後再與包被在微珠上的DNA-探針互補雜(zá)交。流式分(fēn)析儀LABScan ™100(Luminex100/200)或LABScan ™3D(Luminex®FLEXMAP 3D)檢測每個微珠的熒光強度。根據反應類型與已發表HLA基因序列相關反映類型的比較來判定HLA分(fēn)型結果。
産品優勢
1、 擁有CE、FDA、CFDA認證；
2、 完善的客服和專業的技術支持；
3、 國内各大(dà)臨床醫院及血液中(zhōng)心穩定使用；
4、 精确，快速，高通量，經濟；
5、 自動讀取數據和分(fēn)析結果，降低人爲誤差；
6、 無需電(diàn)泳，避免接觸有毒物(wù)質；
7、 比SSP方法DNA用量少，濃度要求低。
Luminex方法原理
流式熒光技術，又(yòu)稱懸浮陣列、液态芯片。經過近20多年的發展，已經成爲全球科研、醫藥和臨床機構廣泛采用的的一(yī)種高通量、高速度的生(shēng)物(wù)學檢測方法。流式熒光有機整合了抗原抗體(tǐ)免疫反應、核酸多重擴增、基于微球的多指标聯檢、毛細管液流分(fēn)析、多色激發熒光和高速數字信号處理技術，具有很高的門檻。
流式熒光聯檢特色的核心是把一(yī)定大(dà)小(xiǎo)（4.5～7μm）、不同熒光染料染色的烯聚物(wù)小(xiǎo)球（統稱編碼微球），共價交聯上針對特定檢測物(wù)的探針、抗原或抗體(tǐ)。應用時，直接混合不同檢測物(wù)的編碼微球，再加入微量待檢樣本，在懸液中(zhōng)靶分(fēn)子與微球表面交聯的分(fēn)子進行特異性地結合，在一(yī)個反應孔内即可以同時完成數十上幾百種不同的生(shēng)物(wù)學反應，而不相互幹擾。最後用流式細胞檢測類儀器進行分(fēn)析，儀器通過多束激光及其被照物(wù)（生(shēng)物(wù)化學标記物(wù)）的發射吸收譜、信号強度，來識别編碼微球、以及定量樣品中(zhōng)各單項指标數值（通過對各檢測微球上報告分(fēn)子的熒光強度讀數）。
流式熒光技術相關的研究論文頻(pín)頻(pín)刊登在《自然》、《臨床化學》、《臨床與診斷免疫學》、《臨床微生(shēng)物(wù)》、《基因組研究》、《蛋白(bái)質組研究》、《癌症》等國際權威學術雜(zá)志(zhì)上。随着更多開(kāi)發及應用者的重視、硬件技術的發展和聯檢分(fēn)析物(wù)的快速增加，其主流地位得到進一(yī)步鞏固。
實驗流程
簡介
LABType® SSO使用序列特異性的寡核苷酸探針連接到熒光染色的微珠上來檢測樣品DNA編碼的等位基因。LABType® SSO技術隻需PCR擴增靶DNA，雜(zá)交和檢測在同一(yī)個反應混合物(wù)中(zhōng)完成，所以該方法既适于小(xiǎo)規模又(yòu)适于大(dà)規模的的HLA分(fēn)型實驗。相對于淋巴細胞毒試驗的實驗結果（1=陰性--- 8=陽性），LABType®的試驗結果隻有陰性和陽性兩種結果，這就排除了複雜(zá)的結果分(fēn)析。此外(wài)，HLA系統的交叉反應組導緻血清學分(fēn)型錯綜複雜(zá),而PCR-SSO（聚合酶鏈式反應—序列特異性寡核苷酸）能區分(fēn)單個核苷酸的改變。
SSO原理
LABType®在反向SSO DNA分(fēn)型法中(zhōng)應用Luminex技術。首先，靶DNA使用組特異性引物(wù)進行PCR擴增。PCR産物(wù)是被生(shēng)物(wù)素化的，可以使用R-藻紅蛋白(bái)結合鏈黴親和素（SAPE）進行檢測。
PCR産物(wù)先被變性，然後再與包被在微珠上的DNA-探針互補雜(zá)交。流式分(fēn)析儀LABScan ™100(Luminex100/200)或LABScan ™3D(Luminex®FLEXMAP 3D)檢測每個微珠的熒光強度。根據反應類型與已發表HLA基因序列相關反映類型的比較來判定HLA分(fēn)型結果。
産品優勢
1、 擁有CE、FDA、CFDA認證；
2、 完善的客服和專業的技術支持；
3、 國内各大(dà)臨床醫院及血液中(zhōng)心穩定使用；
4、 精确，快速，高通量，經濟；
5、 自動讀取數據和分(fēn)析結果，降低人爲誤差；
6、 無需電(diàn)泳，避免接觸有毒物(wù)質；
7、 比SSP方法DNA用量少，濃度要求低。
Luminex方法原理
流式熒光技術，又(yòu)稱懸浮陣列、液态芯片。經過近20多年的發展，已經成爲全球科研、醫藥和臨床機構廣泛采用的的一(yī)種高通量、高速度的生(shēng)物(wù)學檢測方法。流式熒光有機整合了抗原抗體(tǐ)免疫反應、核酸多重擴增、基于微球的多指标聯檢、毛細管液流分(fēn)析、多色激發熒光和高速數字信号處理技術，具有很高的門檻。
流式熒光聯檢特色的核心是把一(yī)定大(dà)小(xiǎo)（4.5～7μm）、不同熒光染料染色的烯聚物(wù)小(xiǎo)球（統稱編碼微球），共價交聯上針對特定檢測物(wù)的探針、抗原或抗體(tǐ)。應用時，直接混合不同檢測物(wù)的編碼微球，再加入微量待檢樣本，在懸液中(zhōng)靶分(fēn)子與微球表面交聯的分(fēn)子進行特異性地結合，在一(yī)個反應孔内即可以同時完成數十上幾百種不同的生(shēng)物(wù)學反應，而不相互幹擾。最後用流式細胞檢測類儀器進行分(fēn)析，儀器通過多束激光及其被照物(wù)（生(shēng)物(wù)化學标記物(wù)）的發射吸收譜、信号強度，來識别編碼微球、以及定量樣品中(zhōng)各單項指标數值（通過對各檢測微球上報告分(fēn)子的熒光強度讀數）。
流式熒光技術相關的研究論文頻(pín)頻(pín)刊登在《自然》、《臨床化學》、《臨床與診斷免疫學》、《臨床微生(shēng)物(wù)》、《基因組研究》、《蛋白(bái)質組研究》、《癌症》等國際權威學術雜(zá)志(zhì)上。随着更多開(kāi)發及應用者的重視、硬件技術的發展和聯檢分(fēn)析物(wù)的快速增加，其主流地位得到進一(yī)步鞏固。
實驗流程