支原體(tǐ)檢測：熒光PCR+毛細管電(diàn)泳（藥典推薦）。2021本平台的支原體(tǐ)檢測法已更新爲熒光PCR+毛細管電(diàn)泳。替代原來的PCR法+恒溫法，靈敏度更高、更精确。
細胞培養液是否有支原體(tǐ)污染，該方法可覆蓋ATCC/DSMZ報道的細胞培養支原體(tǐ)污染中(zhōng)常見的10大(dà)類55個亞種的污染。
支原體(tǐ)檢測
在細胞培養過程中(zhōng)，支原體(tǐ)感染的情況常有發生(shēng)。當細胞（特别是傳代細胞）被支原體(tǐ)污染後，細胞内的DNA、RNA及蛋白(bái)表達會發生(shēng)改變，而細胞的生(shēng)長率通常并未發生(shēng)顯著的影響，因此細胞被支原體(tǐ)污染一(yī)般難以察覺。美德華生(shēng)使用支原體(tǐ)特異性引物(wù)擴增細胞培養樣本，與含有支原體(tǐ)的陽性标準品和不含有支原體(tǐ)的陰性标準品比對，便可知(zhī)道細胞樣本中(zhōng)是否含有支原體(tǐ)。除此之外(wài)，還可以根據擴增産物(wù)的片段大(dà)小(xiǎo)判斷污染細胞的支原體(tǐ)的種類。
PCR法檢測的支原體(tǐ)
13種支原體(tǐ)大(dà)約占污染細胞的支原體(tǐ)種類的99%左右，因此PCR能達到99%；
+恒溫法則能達到99.9%。
華科鑒聯基因可以提供PCR法+恒溫法支原體(tǐ)檢測。暫不提供培養法支原體(tǐ)檢測。
《PCR法支原體(tǐ)檢測試劑盒》可用于檢測一(yī)切可能含支原體(tǐ)的樣品，比如：
（1）體(tǐ)外(wài)細胞培養的上清；
（2）血清；
（3）各種體(tǐ)液，如唾液、尿液、鼻腔分(fēn)泌物(wù)等；
（4）别的液體(tǐ)樣品。本産品僅供研究使用。
産品簡介
哺乳動物(wù)細胞的培養，支原體(tǐ)（Mycoplasma）污染是個世界性的問題。支原體(tǐ)污染幾乎可以改變細胞的所有參數，導緻實驗結果的不準确、甚至完全錯誤（支原體(tǐ)污染對細胞的詳細危害，請參考本公司的網站：www.yisemed.com）。從2013年開(kāi)始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及細胞培養都要進行支原體(tǐ)檢測。相信會有越來越多的高水平期刊将做出同樣的支原體(tǐ)檢測要求。
培養法是相對可靠的支原體(tǐ)檢測技術，但是該方法非常耗時的，需要數周，不适合作爲細胞培養液中(zhōng)支原體(tǐ)污染的快速檢測。此外(wài)，通過固體(tǐ)培養法無法檢測污染細胞的一(yī)種最常見的支原體(tǐ)，即豬鼻支原體(tǐ)（M.Hyorhinis）。這是因爲豬鼻支原體(tǐ)無法在支原體(tǐ)固體(tǐ)培養基上形成可見的菌落。而豬鼻支原體(tǐ)約占所有支原體(tǐ)污染的20-50%。
有的實驗室使用熒光染色法檢測支原體(tǐ)，但是該方法靈敏度太低，當檢測成陽性時，細胞經常已經嚴重污染。
本公司已經開(kāi)發出了專用于體(tǐ)外(wài)細胞培養的《一(yī)步法恒溫支原體(tǐ)檢測試劑盒》，與PCR法支原體(tǐ)檢測相比，其具有許多優點：耗時短、靈敏度高、操作簡單、不會被細胞代謝産物(wù)抑制、結果無需電(diàn)泳肉眼可直接判斷等。
盡管如此，《一(yī)步法恒溫支原體(tǐ)檢測試劑盒》可能也有個小(xiǎo)缺點：因爲《一(yī)步法恒溫支原體(tǐ)檢測試劑盒》需要至少同時使用4條引物(wù)才能完成擴增，其引物(wù)設計相對困難。雖然經我(wǒ)(wǒ)們測試，該試劑盒至少可認識其說明書(shū)中(zhōng)列舉的13種支原體(tǐ)，而這13種支原體(tǐ)大(dà)約占污染細胞的支原體(tǐ)種類的99%左右。但是，不排除《一(yī)步法恒溫支原體(tǐ)檢測試劑盒》無法識别個别在體(tǐ)外(wài)細胞培養中(zhōng)出現概率極低的支原體(tǐ)。爲此，我(wǒ)(wǒ)們特意開(kāi)發了具有廣譜識别能力的《PCR法支原體(tǐ)檢測試劑盒》。
經測試，本公司開(kāi)發的《PCR法支原體(tǐ)檢測試劑盒》至少可以識别在體(tǐ)外(wài)細胞培養中(zhōng)曾經報道出現的20種支原體(tǐ)，根據文獻報道，這些支原體(tǐ)基本上占污染細胞的支原體(tǐ)種類的100%。具體(tǐ)如下(xià)：（1）M. hyorhinis、（2）M. fermentans、（3）M. arginini、（4）M. hominis、（5）M. orale、（6）M. salivarium、（7）M.pirum、（8）Acholeplasma laidlawii、（9）M. agalactiae、（10）M. bovis、(11) M. bovoculi、（12）Acholeplasma axanthum、（13）M. buccale、 (14) M. pneumoniae、（15）M. arthritidis、（16）M. pulmonis、（17）M. gallisepticum、（18）M. gallinarum、（19）M. canis、（20）Ureaplasma urealyticum（注：M.爲Mycoplasma的縮寫）。
如果客戶發現除上述20種支原體(tǐ)外(wài)，還有其他的支原體(tǐ)也會污染體(tǐ)外(wài)培養的細胞，或者客戶純粹就是想檢測其他的支原體(tǐ)，請告訴我(wǒ)(wǒ)們支原體(tǐ)的名稱，我(wǒ)(wǒ)們将進行序列比對，然後告訴你本試劑是否可以識别。此外(wài)，根據支原體(tǐ)DNA的序列，本試劑盒可以識别100多種至今已發現的支原體(tǐ)，具有廣譜的識别能力。
此外(wài)，作爲支原體(tǐ)檢測領域的共識，單獨使用任何一(yī)種支原體(tǐ)檢測方法，都無法做到100%正确，既不會漏檢（假陰性），也不會多檢（假陽性）。嚴格的支原體(tǐ)檢測，至少需要使用兩種（最好使用三種）不同原理的支原體(tǐ)檢測方法同時進行檢測，才能使檢測結果接近100%正确。
如果您想得到100%正确的支原體(tǐ)檢測結果（比如，開(kāi)展細胞治療的客戶，進行幹細胞培養的客戶，生(shēng)産血清、胰酶、培養液的客戶，出售各種原代培養細胞系和腫瘤細胞系的客戶等），任選本公司生(shēng)産的《一(yī)步法恒溫支原體(tǐ)檢測試劑盒》、《PCR法支原體(tǐ)檢測試劑盒》和《發光法支原體(tǐ)檢測試劑盒》中(zhōng)的兩種進行檢測，将會得到比較滿意的結果，檢測的正确率應該在99.9%以上。如果同時使用這三種試劑盒進行檢測，檢測的正确率應該在99.99%以上。