基于STR的方法可以輕松、快速地鑒定細胞身份

　　所有這些問題都可以通過價格低廉的方法來解決，這一(yī)方法目前被用于鑒定細胞系的标準程序，但是這一(yī)鑒定過程必須要進行。RoderickMacLeod及其同事在DSMZ發現約有90%的科學家在提交新細胞系時，忽視或拒絕細胞庫的要求，他們抵觸建立細胞系DNA指紋圖譜以備将來鑒定細胞系使用(5,7)。研究人員(yuán)需要在他們從事研究的早期就接受教育，知(zhī)道如何檢測種系内和種系間的交叉污染，并了解爲什麽這樣做會如此重要。

 

　　在細胞培養中(zhōng)可以使用許多方法對交叉污染進行鑒定，如同功酶分(fēn)析、染色體(tǐ)組分(fēn)型、人淋巴細胞抗原(HLA)分(fēn)型和擴增片段長度多态性(AFLP)的特征分(fēn)析。但是，比較好的方法是STR圖譜法，此方法是在以DNA爲基礎的法醫鑒定領域成功建立起來的。在ATCC，STR分(fēn)析使用的是多重PCR系統)，可以同時擴增多個STR位點加1個性别決定位點Amelogenin(10，11)。每個被分(fēn)析的人源細胞系都有其獨特的DNA重複模式，因此通過與基礎圖譜進行比對，即可對每一(yī)批新細胞系的身份進行确證。STR方法防止了ATCC将其6個"錯誤"細胞系進一(yī)步傳播出去(qù)-因爲經過STR分(fēn)型後，發現原本來自女性的細胞系中(zhōng)存在着Y染色體(tǐ)特異的擴增産物(wù)。此研究團體(tǐ)希望STR圖譜技術能夠作爲全球範圍的檢測并消除細胞系污染的參考技術。

　　即使大(dà)多數科研人員(yuán)所在的實驗室沒有進行STR分(fēn)型的設備，他們仍可通過具備儀器(毛細管電(diàn)泳)、軟件和經驗的研究所中(zhōng)心實驗室和專業服務公司來完成STR分(fēn)型。文獻中(zhōng)，通常建議研究人員(yuán)在培養細胞的較早階段(細胞培養第一(yī)周)來鑒定細胞系的身份。細胞在被凍存前應再一(yī)次進行鑒定;對于活躍生(shēng)長的細胞，每兩個月應鑒定一(yī)次;文獻發表前也應對細胞系身份進行鑒定。如果一(yī)個實驗室使用不止一(yī)種細胞系，則應在實驗最開(kāi)始時，就要對所有的細胞系進行鑒定，以便排除交叉污染(8)。

　　總結

 

　　由于細胞培養體(tǐ)系在生(shēng)物(wù)藥物(wù)的研究和技術發展中(zhōng)非常重要，适當的細胞系鑒定過程即成爲每個研究人員(yuán)的最大(dà)興趣點。然而，交叉污染的問題仍然存在。随着世界範圍内實驗室使用新細胞系的數量增多和頻(pín)率增加，在質量控制(如：細胞系鑒定)的基本原則上産生(shēng)了巨大(dà)的差别。從已經發表的、使用"錯誤"的細胞系而導緻可疑性結果的研究論文，到用于臨床的幹細胞系和其它細胞系，交叉污染影響到了科學研究的每個領域-從實驗台到臨床。如果在細胞培養的處理和操作中(zhōng)不進行重大(dà)變革，那麽交叉污染将會成爲一(yī)個更大(dà)、更嚴重的問題。

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